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Mostrando entradas de marzo, 2020

CUADERNO DE PRACTICAS MICROBIOLIGIA CLINICA

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CUADERNO MICROBIOLOGIA CLINICA

PRACTICA 11: PRUEBAS BIOQUIMICAS COCOS GRAM -

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  PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN DE COCOS GRAM (-) OXIDASA FUNDAMENTO Se basa en la capacidad que tienen algunos microorganismos aerobios o anaerobios facultativos de producir la enzima ‘’citocromo oxidasa’’, que cataliza en la cadena respiratoria, la transferencia de electrones desde un sustrato orgánico hasta el oxígeno. PROCEDIMIENTO Colocamos un trozo de papel de filtro sobre un portaobjetos Añadimos 2-3 gotas de reactivo de Kovacs en el centro del papel Extendemos una colonia del microorganismo (Pseudomonas) con el asa de siembra sobre el papel impregnado con el reactivo El resultado es positivo si observamos aparición de color violeta a los 5-10 segundos. FERMENTACIÓN DE AZÚCARES FUNDAMENTO Las bacterias anaerobias y anaerobias facultativas con frecuencia fermentan los carbohidratos produciendo ácidos orgánicos y gas, que se detectan mediante un indicador de pH y una campana de Durham PROCEDIMIENTO Inoculamos la bacteria (Kle...

PRACTICA 12: PRUEBAS IDENTIFICAITVAS BACILOS GRAM-

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PRUEBAS BIOQUIMICAS IDENTIFICATIVAS BACILOS GRAM NEGATIVOS FUNDAMENTO Para la identificación de los Bacilos Gram Negativos anaerobios, del tipo de las enterobacterias, se realiza una batería de pruebas bioquímicas con las que se identifican a los que se aíslan mas frecuentemente en nuestro medio. Estas pruebas son: Kliger IMVIC:  Producción de Indol Rojo de metilo Voges-Proskauer Citrato Test de la urea Fenil alanina desaminasa Reducción de nitrato  Descarboxilación de lisina, ornitina y arginina (descarboxilasas) También usamos los sistemas comerciales de identificación, que son muy utilizados: Tiras API Enterotube KLIGER Esta prueba permite identificar a la familia de las enterobacterias. El medio Agar hierro de KLIGER, es un medio sólido diferencial, que se preparar en un tubo inclinado y que contiene lactosa, glucosa, peptonas y un indicador de pH (rojo fenol) que vira a amarillo cuando el pH es ácido, y que toma un color rojo mas inten...

PRACTICA 13: API E

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FUNDAMENTO Es un sistema estandarizado que permite la identificación de Enterobacteriaceae y otros bacilos Gram negativos no exigentes, que incluye 21 tests bioquímicos miniaturizados, así como una base de datos. La lista completa de las bacterias posibles de identificar con este sistema se presenta en la Tabla de Identificación al final de la presente ficha técnica.  Se compone de 20 microtubos que contienen los substratos deshidratados. Los microtubos se inoculan con una suspensión bacteriana que reconstituye los tests. Las reacciones producidas durante el periodo de incubación se traducen en cambios de color espontáneos o revelados mediante la adición de reactivos. La lectura de estas reacciones se lleva a cabo utilizando la Tabla de Lectura, y la identificación se obtiene con la ayuda del Catálogo Analítico o del software de identificación. PROCEDIMIENTO Preparamos una suspensión bacteriana. Para ello tomamos una colonia aislada de microorganismos y la resuspe...

PRACTICA 14: ANTIBIOGRAMA

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ANTIBIOGRAMA FUNDAMENTO El antibiograma es la prueba microbiológica que se realiza para determinar la susceptibilidad (sensibilidad o resistencia) de una bacteria a un grupo de antibióticos. Las técnicas de antibiograma son las utilizadas en el laboratorio de microbiología para estudiar la actividad de los antimicrobianos frente a los microorganismos responsables de las infecciones. El antibiograma tiene cuatro utilidades principales: La utilidad básica del antibiograma es la instauración de un tratamiento antibiótico correcto al paciente. Es necesario conocer si el microorganismo responsable de la infección posee mecanismos que le confieran inmunidad frente a algún antibiótico para no incluirlo como terapia. En cuanto al tratamiento el antibiograma no sólo es necesario en la instauración, también resulta útil en el seguimiento e incluso en la confirmación de tratamientos empíricos. En ocasiones la enfermedad infecciosa resulta grave y se comienza el tratamiento ante...